一株高产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌分说及产酶优化条件（三）

2.3 哺育条件对于解淀粉芽孢杆菌F3菌株纤维素酶活性的株高影响

2.3.1 哺育光阴的影响

F3菌株经LB液体哺育基活化后，按4%接种量接种至LB液体哺育基，产纤产酶37℃不断哺育72h，维素差距光阴点的解淀菌分纤维素酶活性服从如图5所示。

由图5可知，粉芽随着哺育光阴的孢杆缩短，F3菌株纤维素酶活性呈回升趋向，说及48h时酶活性最高，优化纤维素酶去世气愿望为15.97U/mL，条件随后纤维素酶活性呈着落趋向，株高故最佳哺育时陆续定为48h，产纤产酶这差距于其余钻研报道中芽孢杆菌纤维素酶去世气愿望最佳哺育光阴3d～4d。维素

2.3.2 哺育温度的解淀菌分影响

活化的F3菌株按4%接种量接种至LB液体哺育基，差距哺育温度下F3菌株纤维素酶去世气愿望的粉芽变更服从如图6所示。随着温度的孢杆飞腾，F3菌株产纤维素酶的去世气愿望呈先回升再着落的趋向，其中仍以37℃哺育温度条件下酶去世气愿望最高，但35℃与37℃两种哺育温度对于F3菌株纤维素酶去世气愿望的影响差距不清晰（p＞0.05），其产纤维素酶的最佳哺育温度与其余钻研报道的解淀粉芽孢杆菌存在较大差距，剖析温度对于解淀粉芽孢杆菌纤维素酶去世气愿望的影响具备清晰的菌株特异性。

2.3.3 接种量的影响

F3菌株经活化后，分说按差距接种量接种至LB液体哺育基中37℃哺育48h，纤维素酶去世气愿望检测服从如图7所示。接种量为6%时，F3菌株的纤维素酶去世气愿望最高为17.62U/mL，但与4%接种量时其酶去世气愿望差距不清晰（p＞0.05），这与其余钻研报道相似。

2.3.4 哺育基初始pH对于F3菌株纤维素酶活性的影响

活化的F3菌株分说按6%接种量接种至差距初始pH的LB液体哺育基中，37℃哺育48h，纤维素酶去世气愿望检测服从如图8所示。

由图8可知，哺育基初始pH对于F3菌株产纤维素酶的去世气愿望影响清晰，其中以初始pH为pH7.0时纤维素酶去世气愿望最高，达18.22U/mL，清晰高于此外初始pH时菌株所产的纤维素酶去世气愿望（p＜0.05）。此外，从差距初始pH条件下菌株的妨碍情景看，初始pH为pH11.0时，F3菌株的哺育液相对于廓清，这剖析F3菌株不适宜在pH11.0的碱性条件妨碍，这也导致了此条件下其产酶能耐最弱。比照于pH7.0条件，F3菌株在pH3.0的酸性条件下长势也不强，但仍具备确定的酶活性，而何颂捷等报道的解淀粉芽孢杆菌在pH3.0的初始pH下不能妨碍，故无纤维素酶活性。由此剖析，F3菌株更适宜在中性条件下妨碍。

2.4 解淀粉芽孢杆菌F3产纤维素酶条件优化

凭证单因素试验服从，凭证表1落选取的因素及水平，妨碍正交试验优化，服从如表2所示。4种因素对于F3菌株产纤维素酶去世气愿望的影响巨细挨次挨次为：哺育基初始pH＞哺育光阴＞哺育温度＞接种量，纤维素酶去世气愿望优化的最佳组合为A₂B₂C₂D₃。凭证最佳组合的哺育条件妨碍哺育，即LB液体哺育基的初始pH调至pH7.0，按6%接种量接种F3菌株，在37℃哺育温度下不断哺育60h，解淀粉芽孢杆菌F3菌株哺育液中纤维素酶去世气愿望可达21.14U/mL，比照于正交试验优化前最高酶活后退了16.03%。F3菌株所产纤维素酶的去世气愿望清晰高于林晓琼等报道的解淀粉芽孢杆菌，具备潜在的运用价钱。

3 论断

从做作界中开掘具备纤维素酶活性的微生物菌种资源具备紧张意思。文中从发酵豆豉中分说到一株可产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌植物亚种F3菌株，经由单因素及正交试验优化了其液体哺育的最佳产酶条件，即哺育温度37℃、接种量6%、初始pH为pH7.0、发酵光阴60h，纤维素酶去世气愿望可达21.14U/mL。

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